Nhưng rồi quân Pháp huy động một lực lượng hùng hậu bao vây căn cứ Gò Công. Ngày 26-2-1863, Pháp mở đợt tấn công lớn vào căn cứ nghĩa quân. Cuộc chiến diễn ra vô cùng ác liệt. Trương Định buộc phải rút quân về Biên Hòa lập căn cứ ở Lí Nhơn và đưa một bộ phận nghĩa quân về Thủ Dầu Một - Tây Ninh để tiếp tục chiến đấu. Mùa thu năm 1864, trong một trận chiến tại căn cứ Tân Hòa, ông rơi vào vòng vây của quân Pháp. Bất chấp lực lượng chênh lệch, Trương Định chỉ huy nghĩa quân quyết tử chiến với giặc. Trong lúc chiến đấu, ông chẳng may bị đạn gãy xương sống. Không để rơi vào tay giặc, Trương Định rút gươm tự vẫn vào ngày 20-8-1864. Khi ấy ông mới 44 tuổi. Cái chết của Trương Định là tổn thất lớn đối với phong trào kháng chiến chống Pháp của nhân dân ta lúc bấy giờ. Nhà thơ Nguyễn Đình Chiểu đã viết 12 bài thơ viếng bạn. Trời Bến Nghé mây mưa sùi sụt Thương đấng anh hùng gặp lúc gian truân Đất Gò Công cây cỏ ủ ê Cảm niềm thần tử, hết lòng trung ái Xưa còn làm tướng, giốc rạng ngời hai chữ Bình Tây Nay thác theo thần, xin dựng hộ một câu phúc thán. Con trai ông là Trương Quyền rút quân lên mạn Châu Đốc, tiếp tục cuộc chiến đấu của cha, kéo dài thêm sáu năm nữa. Nhân dân Gò Công coi ông như một vị thần linh thiêng bảo vệ dân, tên ông được gọi một cách tôn kính là Trương Công Định. Hằng năm vào hai ngày giỗ ông, nhân dân Gò Công lại mở lễ hội lớn để tưởng nhớ tới người anh hùng đã hi sinh vì nước vì dân. Nguồn: Sử ta chuyện xưa kể lại (tập 4) - Nhà xuất bản Kim Đồng